رسولی ایرج، موسوی گرگری سید لطیف، سروری زنجانی رحیم، درویش علیپور آستانه شکیبا. تعیین خصوصیات سویه بومی گونه باسیلوسی مولد آنزیم آلفا آمیلاز مقاوم به دما. مجله دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان. 1388; 8 (4) :303-316
URL: http://journal.rums.ac.ir/article-1-5351-fa.html
چکیده: (1627 مشاهده)
زمینه و هدف: آنزیم آلفا آمیلازهای مقاوم به دما کاربردهای تجاری وسیعی در فرآوری نشاسته، تخمیر و تهیه محصولات کربوهیدراتی دارد و جایگزین هیدرولیز شیمیایی نشاسته در فرآوری صنعتی شده است. هدف خصوصیات سویه بومی گونه باسیلوس مولد آنزیم آلفا آمیلاز مقاوم به دما بوده است.
مواد و روشها: در این مطالعه آزمایشگاهی باسیلوس جدا شده با نام B.licheniformis shahed-07 با استفاده از روشهای بیوشیمیایی شناسایی شد. این باسیلوس در محیط مایع برای تولید آلفا آمیلاز کشت داده شد. محیطهای تولید آنزیم با استفاده از منابع مختلف کربنی و نیتروژنی ارزیابی و محیط مناسب فرموله گردید. پایداری آنزیم تولیدی، پس از تخلیص نسبی آن، در برابر تغییرات دما، pH، فلزات یونی و عوامل کلاتهکننده ارزیابی شد.
یافتهها: حداکثر میزان آنزیم، در دمای 50 درجه سانتیگراد و 7= pH در طی 26 ساعت تولید شد. با افزودن 5/0% تریپتوفن به محیط کشت، میزان تولید آنزیم تا 202% افزایش یافت در حالی که 5/0% پپتون و لیزین به شدت موجب افت تولید شد. در مقایسه با آنزیم ناخالص، خلوص آنزیم نیمه تخلیص شده 77/3 برابر و فعالیت آنزیمی آن 64/32 برابر بود. این آنزیم در ژل الکترفورز SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) با 2/0% نشاسته تک باند با وزن مولکولی 60000 دالتون فعالیت آمیلولیتیکی نشان داد. فعالیت مطلوب آنزیم در 70 درجه سانتیگراد و 5/7=pH بود، این آنزیم همچنین در دامنه pH بین 6 تا 7 به مدت 24 ساعت پایداری داشت. یون جیوه به طور کلی بازدارنده فعالیت آنزیم بوده و یونهای منگنز، آهن، کبالت و کلسیم سبب افزایش فعالیت آن شدند.
نتیجهگیری: سویه B.licheniformis Shahed-07 سطح مطلوبی از آلفا آمیلاز مقاوم به دما، متناسب با ویژگیهای مورد نیاز فرآوری نشاسته و صنایع غذایی تولید میکند. فرآیند تولید، بعد از بهینهسازی، میتواند در سطح تجاری مطرح شود.
واژههای کلیدی: باسیلوس لیکنیفرمیس، آلفا آمیلاز، بهینهسازی، محیط تولید
نوع مطالعه:
پژوهشي |
موضوع مقاله:
زيست شناسي دریافت: 1399/2/27 | پذیرش: 1399/2/27 | انتشار: 1399/2/27